Почему именно непрямой антиглобулиновий тест (НАГТ)?

Необходимость организации иммуногематологических исследований по выявлению антиэритроцитарных антител неполной формы или проведение пробы на совместимость по системе Резус ставит перед специалистами лабораторий вопрос какой же из методов выбрать: с применением 33% раствора полиглюкина, 10% раствора желатины или антиглобулинового реагента. Попробуем разобраться.

Известно, что аллоантитела к антигенам эритроцитов можно выявить на разных этапах тестирования сыворотки: АВ0 – определение, скрининг антител, пробы на совместимость.

При этом необходимо помнить, что аллоиммунные антитела бывают полной и неполной формы, поэтому и выявляют их с применением разных методов (Таблица 1).

Полные антитела выявляют в реакции солевой агглютинации при разных температурах: 37 ˚С, 20 ˚С, 4 ˚С.

Неполные антитела выявляют непрямой пробой Кумбса или реакцией конглютинации с применением коллоидов (желатины, полиглюкина и т.п.). Обращаем внимание, что именно неполные антитела являются наиболее трансфузионно опасными и играют ключевое значение в развитии гемолитической болезни новорожденных (ГБН).

Таблица 1 Методы определения антиэритроцитарных антител

Антитела к антигенам

Методы исследования

на плоскости в солевой среде

с 33% раствором полиглюкина

с 10% раствором желатины

НАГТ

(п пробирках, в геле)

Гелевый тест (зависит от вида карты)

AB

да

И да, и нет, в зависимости от титра антител

да

нет

да

DCE

маловероятно

да

да

да

Kk

маловероятно

да

да

да

Fya, Fyb

нет

нет

 

да

да

Jka, Jkb

нет

нет

 

да

да

S

маловероятно

нет

 

да

да

Lea, Leb

да

да

да

да

да

P

да

да

да

маловероятно

да

MN

да

маловероятно

да

маловероятно

да

H

да

маловероятно

да

маловероятно

да

Из таблицы видно, что чувствительность метода определения антиэритроцитарных антител, в том числе пробы на совместимость по антигенам системы Резус, с применением 33% раствора полиглюкина является очень низкой. Поэтому использовать её в стационарных лечебных учреждениях не рекомендуется. Допускается проведение этой пробы при необходимости переливания компонентов крови в экстремальных условиях, когда отсутствует необходимое оборудование.

В медицинской практике принято проводить пробы на совместимость с применением 10% раствора желатины.

Необходимо отметить, что при определении антиэритроцитарных антител, а также при проведении проб на совместимость по системе Резус, можно выявить не только неполные изоиммунные антитела к антигенам системы Резус (D, С, Е, с, е), а также к антигенам других систем (Келл, Даффи, Кидд и др.). В этом отношении наиболее чувствительным методом является непрямая проба Кумбса (НАГТ).

Обращаем внимание! Непрямая проба Кумбса, непрямой тест Кумбса, непрямой антиглобулиновий тест (НАГТ) – это разные названия одного метода.

 

 

 

Непрямой антиглобулиновий тест (НАГТ)

золотой стандарт иммуногематологии и «высший пилотаж» практических умений

врачей-лаборантов.

В настоящее время НАГТ можно проводить в пробирках или в гелевих картах. Не каждая лаборатория может использовать гелевые карты для проведения НАГТ, но каждая лаборатория может проводить исследования в пробирках. Для проведения НАГТ в пробирках (определение антиэритроцитарных антител неполной формы, проведение пробы на совместимость по системе Резус) ЧП «ГРУППОТЕСТ» предлагает диагностические реагенты (Таблица 2), применение которых позволит не только выполнить пробу Кумбса, но и обеспечит уверенность в том, что полученные результаты являются достоверными.

Таблица 2 Диагностические реагенты «ГРУППОТЕСТ»® для проведения НАГТ в пробирках

п/п

Название реагента

Назначение*

1

1.1 Диагностический полиспецифический античеловеческий глобулин

анти-С3d IgМ/ IgG plus

или

1.2 Диагностический античеловеческий глобулин анти-IgG

Основные реагенты, без которых невозможно проведение НАГТ.

При выборе реагента необходимо учесть следующее:

реагент 1.1 при инкубации со свежей сывороткой может давать ложноположительные результаты;

при исследовании аутоиммунной гемолитической анемии (АИГА) рекомендовано проводить исследования с использованием обоих реагентов для проведения дифференциальной диагностики.

2

НАБОР №5

Набор растворов

Стандарт анти-D

Специальная сыворотка АВ

Контроль правильности проведения НАГТ.

Приготовление положительного контроля (ПК) и контроля негативного результата теста Кумбса (КНРК): стандарт анти-D + 20% суспензия стандартных эритроцитов группы 0 Rh+поз. CcDEe (Набор 1-20 или 9-20).

Приготовления негативного контроля (НК): стандарт анти-D + 20% суспензия стандартных эритроцитов группы 0 Rh-нег. сcdеe (Набор 1-20 или 9-20) или специальная сыворотка АВ + 20% суспензия стандартных эритроцитов группы 0 Rh+поз. CcDEe (Набор 1-20 или 9-20).

3

НАБОР №1-20

20% суспензия стандартных эритроцитов группы

0 Rh+поз. CcDEe;

0 Rh-нег. сcdеe;

А1 Rh+поз.; В Rh+поз.

или

НАБОР №9-20

20% суспензия стандартных эритроцитов группы

0 Rh+поз. CcDEe;

0 Rh-нег. сcdеe;

А1; В.

Контроль правильности проведения НАГТ.

Приготовление положительного контроля (ПК) и контроля негативного результата теста Кумбса (КНРК): стандарт анти-D + 20% суспензия стандартных эритроцитов группы 0 Rh+поз. CcDEe (Набор 1-20 или 9-20).

Приготовления негативного контроля (НК): стандарт анти-D + 20% суспензия стандартных эритроцитов группы 0 Rh-нег. сcdеe (Набор 1-20 или 9-20) или специальная сыворотка АВ +20% суспензия стандартных эритроцитов группы 0 Rh+поз. CcDEe (Набор 1-20 или 9-20).

4

Контроль теста Кумбса

Подтверждение правильности негативного результата антиглобулинового теста в пробирках.

5

LISS «ГРУПОТЕСТ»® -

Раствор низкой ионной силы

Уменьшение времени инкубации до 15 минут (вместо 60 минут)

*Подробности в соответствующих инструкциях для медицинского применения

 

ПРАВИЛЬНОГО ВЫБОРА И ДОСТОВЕРНЫХ РЕЗУЛЬТАТОВ!

Новости