Уважаемые коллеги! Отвечаем на актуальный вопрос расхода моноклональных реагентов для типирования крови при проведении исследований. Выясним, какое же количество определений можно провести из одного флакона реагента, от чего это зависит и какой же размер (объем) капли составляющих для реакции агглютинации.
При проведении реакции прямой агглютинации на плоскости, в пробирках или в микроплатах единицей измерения реагентов и образца крови является капля. Реакция агглютинации на плоскости изначально относилась к так называемым экспресс-методам, не требующим значительного оборудования. По ряду определенных причин эта реакция стала основной при определении группы крови, хотя в определенных случаях и при определении определенных антигенов она малочувствительна. Именно в экспресс-методах капля является той единицей измерения, которая не требует специального измерительного оборудования. Для удобства пользователей флаконы с реагентами оснащены капельницами. Эти капельницы не являются измерительными приборами, поэтому говорить о том, что они четко дозируют, размер капли некорректен. Кроме того, на размер капли влияет степень нажатия на флакон или пипетку специалистом, производящим определение. Обычно размер такой капли составляет 35-45 мкл.
Хочется отметить, что столь простая и уже привычная для специалистов реакция агглютинации на самом деле очень сложный процесс, который происходит при определенных условиях. Одним из таких условий является оптимальное соотношение антитело-антиген, то есть реагент-эритроциты. И здесь важно в погоне за большим количеством «дешевых» определений из одинакового объема реагента читать методику, чтобы понимать, благодаря чему это достигается. Так, при уменьшении капли реагента необходимо соответственно снизить каплю исследуемых эритроцитов. Это можно сделать только за счет приготовления взвеси исследуемых эритроцитов, для чего тоже нужно время и определенное оборудование. Кроме того, использование капель маленького объема на плоскости может привести к быстрому подсыханию капли или к невозможности заметить слабую агглютинацию, что означает получение ложных результатов.
Диагностические моноклональные реагенты «ГРУПОТЕСТ»® используют лаборатории Украины с различным материально-техническим оснащением, поэтому в инструкции по медицинскому применению приведены различные модификации реакции агглютинации. Каждая лаборатория может выбрать оптимальный подход для себя.
Какое количество определений можно провести при использовании флакона объемом 10 мл? При работе можно соблюдать соотношение, приведенное в Инструкции «Определение групп крови по системам АВО, Резус и иммунных антител», утвержденной приказом МОЗ Украины от 05.07.1999г. № 164. Количество определений в таком случае составляет 100. При проведении определений согласно Инструкции для медицинского применения реагента «ГРУПОТЕСТ» количество определений из флакона объемом 10 мл составляет 140-240 в зависимости от выбранной модификации реакции агглютинации. Размер капли при использовании капельницы реагентов «ГРУПОТЕСТ» составляет ориентировочно 35 мкл. Считаем, что при использовании в качестве единицы измерения капли будет целесообразным проведение валидации капли (капель) в условиях конкретной лаборатории с учетом конкретного оборудования, методики и стиля работы специалистов. Таким образом, когда известен размер «вашей» капли, количество реагента во флаконе, можно легко подсчитать количество исследований, которое вы можете провести.