Необходимость организации иммуногематологических исследований по выявлению антиэритроцитарных антител неполной формы или проведение пробы на совместимость по системе Резус ставит перед специалистами лабораторий вопрос какой же из методов выбрать: с применением 33% раствора полиглюкина, 10% раствора желатины или антиглобулинового реагента. Попробуем разобраться.

Известно, что аллоантитела к антигенам эритроцитов можно выявить на разных этапах тестирования сыворотки: АВ0 – определение, скрининг антител, пробы на совместимость.

При этом необходимо помнить, что аллоиммунные антитела бывают полной и неполной формы, поэтому и выявляют их с применением разных методов (Таблица 1).

Полные антитела выявляют в реакции солевой агглютинации при разных температурах: 37 ˚С, 20 ˚С, 4 ˚С.

Неполные антитела выявляют непрямой пробой Кумбса или реакцией конглютинации с применением коллоидов (желатины, полиглюкина и т.п.). Обращаем внимание, что именно неполные антитела являются наиболее трансфузионно опасными и играют ключевое значение в развитии гемолитической болезни новорожденных (ГБН).

Таблица 1 Методы определения антиэритроцитарных антител

Антитела к антигенам Методы исследования
на плоскости в солевой среде с 33% раствором полиглюкина с 10% раствором желатины НАГТ (п пробирках, в геле) Гелевый тест (зависит от вида карты)
AB да И да, и нет, в зависимости от титра антител да нет да
DCE маловероятно да да да
Kk маловероятно да да да
Fya, Fyb нет нет   да да
Jka, Jkb нет нет   да да
S мавероятно нет   да да
Lea, Leb да да да да да
P да да да маловероятно да
MN да маловероятно да маловероятно да
H да маловероятно да маловероятно да

Из таблицы видно, что чувствительность метода определения антиэритроцитарных антител, в том числе пробы на совместимость по антигенам системы Резус, с применением 33% раствора полиглюкина является очень низкой. Поэтому использовать её в стационарных лечебных учреждениях не рекомендуется. Допускается проведение этой пробы при необходимости переливания компонентов крови в экстремальных условиях, когда отсутствует необходимое оборудование.

В медицинской практике принято проводить пробы на совместимость с применением 10% раствора желатины.

Необходимо отметить, что при определении антиэритроцитарных антител, а также при проведении проб на совместимость по системе Резус, можно выявить не только неполные изоиммунные антитела к антигенам системы Резус (D, С, Е, с, е), а также к антигенам других систем (Келл, Даффи, Кидд и др.). В этом отношении наиболее чувствительным методом является непрямая проба Кумбса (НАГТ).

Обращаем внимание! Непрямая проба Кумбса, непрямой тест Кумбса, непрямой антиглобулиновий тест (НАГТ) – это разные названия одного метода.


Непрямой антиглобулиновий тест (НАГТ) – золотой стандарт иммуногематологии и «высший пилотаж» практических умений врачей-лаборантов.

В настоящее время НАГТ можно проводить в пробирках или в гелевих картах. Не каждая лаборатория может использовать гелевые карты для проведения НАГТ, но каждая лаборатория может проводить исследования в пробирках. Для проведения НАГТ в пробирках (определение антиэритроцитарных антител неполной формы, проведение пробы на совместимость по системе Резус) ЧП «ГРУППОТЕСТ» предлагает диагностические реагенты (Таблица 2), применение которых позволит не только выполнить пробу Кумбса, но и обеспечит уверенность в том, что полученные результаты являются достоверными.

Таблица 2 Диагностические реагенты «ГРУППОТЕСТ»® для проведения НАГТ в пробирках

№п/п Название реагента Назначение*
1 1.1 Диагностический полиспецифический античеловеческий глобулин анти-С3d IgМ/ IgG plus или 1.2 Диагностический античеловеческий глобулин анти-IgG Основные реагенты, без которых невозможно проведение НАГТ. При выборе реагента необходимо учесть следующее: реагент 1.1 при инкубации со свежей сывороткой может давать ложноположительные результаты; при исследовании аутоиммунной гемолитической анемии (АИГА) рекомендовано проводить исследования с использованием обоих реагентов для проведения дифференциальной диагностики.
2 НАБОР №5 Набор растворов Стандарт анти-D Специальная сыворотка АВ Контроль правильности проведения НАГТ. Приготовление положительного контроля (ПК) и контроля негативного результата теста Кумбса (КНРК): стандарт анти-D + 20% суспензия стандартных эритроцитов группы 0 Rh+поз. CcDEe (Набор 1-20 или 9-20). Приготовления негативного контроля (НК): стандарт анти-D + 20% суспензия стандартных эритроцитов группы 0 Rh-нег. сcdеe (Набор 1-20 или 9-20) или специальная сыворотка АВ + 20% суспензия стандартных эритроцитов группы 0 Rh+поз. CcDEe (Набор 1-20 или 9-20).
3 НАБОР №1-20 20% суспензия стандартных эритроцитов группы 0 Rh+поз. CcDEe; 0 Rh-нег. сcdеe; А1 Rh+поз.; В Rh+поз. или НАБОР №9-20 20% суспензия стандартных эритроцитов группы 0 Rh+поз. CcDEe; 0 Rh-нег. сcdеe; А1; В. Контроль правильности проведения НАГТ. Приготовление положительного контроля (ПК) и контроля негативного результата теста Кумбса (КНРК): стандарт анти-D + 20% суспензия стандартных эритроцитов группы 0 Rh+поз. CcDEe (Набор 1-20 или 9-20). Приготовления негативного контроля (НК): стандарт анти-D + 20% суспензия стандартных эритроцитов группы 0 Rh-нег. сcdеe (Набор 1-20 или 9-20) или специальная сыворотка АВ +20% суспензия стандартных эритроцитов группы 0 Rh+поз. CcDEe (Набор 1-20 или 9-20).
4 Контроль теста Кумбса Подтверждение правильности негативного результата антиглобулинового теста в пробирках.
5 LISS «ГРУПОТЕСТ»® - Раствор низкой ионной силы Уменьшение времени инкубации до 15 минут (вместо 60 минут)
 
 Подробности в соответствующих инструкциях для медицинского применения

ПРАВИЛЬНОГО ВЫБОРА И ДОСТОВЕРНЫХ РЕЗУЛЬТАТОВ!