Шановні колеги!
Відповідаємо на актуальне питання щодо витрат моноклональних реагентів для типування крові при проведенні досліджень. З’ясуємо, яку ж кількість визначень можна провести з одного флакону реагенту, від чого це залежить і який же розмір (об’єм) краплі складових для реакції аглютинації.
При проведенні реакції прямої аглютинації на площині, в пробірках або в мікроплатах одиницею виміру реагентів і зразка крові є крапля. Реакція аглютинації на площині спочатку відносилась до так званих експрес-методів, які не потребують значного обладнання. З ряду певних причин ця реакція стала основною при визначенні групи крові, хоча в певних випадках і при визначенні певних антигенів вона є малочутливою. Саме в експрес-методах крапля є тією одиницею виміру, яка не потребує спеціального вимірювального обладнання. Для зручності користувачів флакони з реагентами оснащені крапельницями. Ці крапельниці не є вимірювальними приладами, тому говорити про те, що вони чітко дозують розмір краплі є некоректним. Крім того, на розмір краплі впливає ступінь натискання на флакон або піпетку фахівцем, який проводить визначення. Зазвичай розмір такої краплі складає 35-45 мкл.
Хочеться зазначити, що така проста і вже звична для фахівців реакція аглютинації насправді є дуже складним процесом, який відбувається за певних умов. Однією з таких умов є оптимальне співвідношення антитіло-антиген, тобто реагент-еритроцити. І тут важливо в гонитві за великою кількістю «дешевих» визначень з однакового об’єму реагенту читати методику, щоб розуміти завдяки чому це досягається. Так, при зменшенні краплі реагенту необхідно відповідно зменшити краплю досліджуваних еритроцитів. Це можна зробити тільки за рахунок приготування суспензії досліджуваних еритроцитів, для чого теж потрібен час і певне обладнання. Крім того використання крапель маленького об’єму на площині може призвести до швидкого підсихання краплі або до неможливості помітити слабку аглютинацію, що означає отримання хибних результатів.
Діагностичні моноклональні реагенти «ГРУПОТЕСТ»® використовують лабораторії України з різним матеріально-технічним оснащенням, тому в інструкції для медичного застосування наведені різні модифікації реакції аглютинації. Кожна лабораторія може обрати оптимальний для себе підхід.
Яку ж кількість визначень можна провести при використанні флакону об’ємом 10 мл? При роботі можна дотримуватись співвідношення, яке наведено в Інструкції «Визначення груп крові за системами АВО, Резус та імунних антитіл», затвердженої наказом МОЗ України від 05.07.1999р. № 164. Кількість визначень в такому випадку складає 100. При проведенні визначень згідно з Інструкцією для медичного застосування реагенту «ГРУПОТЕСТ»® кількість визначень з флакону об’ємом 10 мл складає 100-400 залежно від обраної модифікації реакції аглютинації. Розмір краплі при використанні крапельниці реагентів «ГРУПОТЕСТ»® складає орієнтовно 35 мкл. Вважаємо, що при використанні в якості одиниці вимірювання краплі, буде доцільним проведення валідації краплі (крапель) в умовах конкретної лабораторії з урахуванням конкретного обладнання, методики і стилю роботи фахівців. Таким чином, коли відомий розмір «вашої» краплі, кількість реагенту у флаконі, то можна легко підрахувати кількість досліджень, яку ви можете провести.
