Чому саме непрямий антиглобуліновий тест (НАГТ)?

Необхідність організації імуногематологічних досліджень з питань виявлення антиеритроцитарних антитіл неповної форми або проведення проби на сумісність за системою Резус ставить перед фахівцями лабораторій питання який з методів обрати: із застосуванням 33% розчину поліглюкіну, 10% розчину желатини або антиглобулінового реагенту. Спробуємо розібратись.

Відомо, що алоантитіла до антигенів еритроцитів можуть виявлятися на різних етапах тестування сироватки: АВ0 – тестування, скринінг антитіл, проби на сумісність.

При цьому слід памʼятати, що алоімунні антиеритроцитарні антитіла можуть бути як повної, так і неповної форми, тому їх слід виявляти із застосуванням різних методів (таблиця 1).

Повні антитіла виявляються в реакції сольової аглютинації за різних температурних режимів: 37 ˚С, 20 ˚С, 4 ˚С.

Неповні антитіла виявляються за допомогою непрямої проби Кумбса або реакцій конглютинації з використанням колоїдів (желатин, поліглюкін, тощо). Нагадаємо, що саме неповні антитіла є найбільш трансфузійно небезпечними і відіграють ключову роль у виникненні гемолітичної хвороби новонароджених (ГХН).

Таблиця 1 Методи виявлення антиеритроцитарних антитіл

Антитіла до антигенів	Методи дослідження
Антитіла до антигенів	на площині в сольовому середовищі	з 33% розчином поліглюкіну	з 10% розчином желатини	НАГТ (пробірковий, в гелі)	Гелевий тест (залежно від типу карти)
AB	так	Так і ні, в залежності від титру антитіл	так	ні	так
DCE	малоймовірно	так	так	так	так
Kk	малоймовірно	так	так	так	так
Fy^a , Fy^b	ні	ні		так	так
Jk^a , Jk^b	ні	ні		так	так
S	малоймовірно	ні		так	так
Le^a , Le^b	так	так	так	так	так
P	так	так	так	малоймовірно	так
MN	так	малоймовірно	так	малоймовірно	так
H	так	малоймовірно	так	малоймовірно	так

З таблиці видно, що чутливість методу визначення антиеритроцитарних антитіл, в тому числі проби на сумісність крові за антигенами системи Резус, із застосуванням 33% розчину поліглюкіну є низькою. Тому, застосовувати її у стаціонарних лікувальних закладах не рекомендується. Допускається виконання цієї проби при необхідності проведення переливання крові в екстремальних умовах, коли відсутнє відповідне обладнання, тощо.

В медичній практиці прийнято застосовувати проведення проби на сумісність крові за антигенами системи Резус із застосуванням 10% розчину желатини.

Необхідно зазначити, що під час визначення антиеритроцитарних антитіл, а також при проведенні проб на сумісність за системою Резус, можна виявити не тільки неповні ізоімунні антитіла до антигенів системи Резус (D, С, Е, с, е), а також до антигенів інших систем (Келл, Даффі, Кідд тощо). В цьому відношенні найбільш чутливою пробою є непряма проба Кумбса (НАГТ).

Памʾятаємо! Непряма проба Кумбса, непрямий тест Кумбса, непрямий антиглобуліновий тест (НАГТ) – це різні назви одного методу.

Непрямий антиглобуліновий тест (НАГТ) – золотий стандарт імуногематології та «вищий пілотаж» навичок лікарів-лаборантів.

Станом на сьогодні НАГТ можна проводити в пробірках або в гелевих картах. Не кожна лабораторія може забезпечити проведення НАГТ за допомогою гелевих карт, але кожна лабораторія може запровадити метод у пробірках. Для проведення НАГТ в пробірках (визначення антиеритроцитарних антитіл неповної форми, проведення проби на сумісність за системою Резус) ПП «ГРУПОТЕСТ» пропонує діагностичні реагенти (таблиця 2), використання яких дозволить не просто провести пробу Кумбса, а й бути впевненими, що отримані результати є достовірними і їх можна брати до обліку.

Таблиця 2 Діагностичні реагенти «ГРУПОТЕСТ»^®для проведення НАГТ у пробірках

№з/п	Назва реагенту	Призначення*
1	1.1 Діагностичний поліспецифічний антилюдський глобулін анти-С3d IgМ/ IgG plus або 1.2 Діагностичний антилюдський глобулін анти-IgG	Основні реагенти, без яких неможливо проведення НАГТ. При виборі реагенту необхідно врахувати наступне: реагент 1.1 під час інкубації зі свіжою сироваткою може давати хибнопозитивні результати; при дослідженні аутоімунної гемолітичної анемії (АІГА) рекомендовано проводити дослідження з використанням обох реагентів з метою диференціальної діагностики.
2	НАБІР №5 Набір розчинів Стандарт анти-D Спеціальна сироватка АВ	Контроль правильності проведення НАГТ. Приготування позитивного контролю (ПК) та контролю негативного результату тесту Кумбса (КНРК): стандарт анти-D + 20% суспензія стандартних еритроцитів групи 0 Rh+поз. CcDEe (Набір 1-20 або 9-20). Приготування негативного контролю (НК): стандарт анти-D + 20% суспензія стандартних еритроцитів групи 0 Rh-нег. сcdеe (Набір 1-20 або 9-20) або спеціальна сироватка АВ +20% суспензія стандартних еритроцитів групи 0 Rh+поз. CcDEe (Набір 1-20 або 9-20).
3	НАБІР №1-20 20% суспензія стандартних еритроцитів групи 0 Rh+поз. CcDEe; 0 Rh-нег. сcdеe; А₁ Rh+поз.; В Rh+поз. або НАБІР №9-20 20% суспензія стандартних еритроцитів групи 0 Rh+поз. CcDEe; 0 Rh-нег. сcdеe; А₁; В.	Контроль правильності проведення НАГТ. Приготування позитивного контролю (ПК) та контролю негативного результату тесту Кумбса (КНРК): стандарт анти-D + 20% суспензія стандартних еритроцитів групи 0 Rh+поз. CcDEe (Набір 1-20 або 9-20). Приготування негативного контролю (НК): стандарт анти-D + 20% суспензія стандартних еритроцитів групи 0 Rh-нег. сcdеe (Набір 1-20 або 9-20) або спеціальна сироватка АВ +20% суспензія стандартних еритроцитів групи 0 Rh+поз. CcDEe (Набір 1-20 або 9-20).
4	Контроль тесту Кумбса	Підтвердження правильності негативного результату антиглобулінового тесту в пробірках.
5	LISS «ГРУПОТЕСТ»^® - розчин низької іонної сили	Зменшення часу інкубації до 15 хвилин (з 60 хвилин)